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#9523 Smad3 (C67H9) Rabbit mAb

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2019年12月13日15時35分 現在
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#9523S100 μL56,000
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#9523T20 μL39,000
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尚、構成品の単品販売は致しておりません。

SMAD3 製品一覧 | #9523 が入っているAntibody Sampler キット一覧

感度分子量 (kDa)抗体の由来貯法
内在性52Rabbit IgG-20℃
種交差性 (社内試験済)
交差する可能性がある種 i

社内試験はしていませんが、配列が100%相同であるため反応すると推定される種

ヒト、マウス、ラット、サル アフリカツメガエル、ゼブラフィッシュ、ウシ
9523 の推奨プロトコール i

最適な結果を得るために:Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。
推奨プロトコールはCST社内試験の徹底的なバリデーションに基づいて作成されておりますので、正確かつ再現性の高い結果が得られます。

注:各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。

 

ウェスタンブロッティング (1:1000)免疫沈降 (1:100)免疫蛍光細胞染色 (IF-IC) (1:100)フローサイトメトリー (1:100)クロマチン免疫沈降 (1:50)クロマチン免疫沈降シークエンス (1:50)

CST推奨プロトコールに欠かせない関連製品

特異性・感度
内在性レベルのSmad3 タンパク質を検出します。他のファミリータンパク質とは交差しません。
使用抗原
Smad3 タンパク質のN末端領域 (合成ペプチド)

ホモロジー (相同性) 検索をご希望の場合 >>>

ホモロジー検索をご要望の際は、ご希望のサンプル種のアミノ酸配列とともにお問合せください。

社内データ

※下記の社内データは、すべて9523 の推奨プロトコールで実験した結果です。

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from HT1080 (human), C2C12 (mouse) and B35 (rat) using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb.

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from HT1080 cells, treated with TGF-β1, TGFR inhibitor SB-431542 or BMP-2, using Phospho-Smad3 (Ser423/425) (C25A9) Rabbit mAb #9520 (upper) or total Smad3 (C67H9) Rabbit mAb #9523 (lower).

IF-IC

IF-IC

Confocal immunofluorescent analysis of HT1080 cells, untreated (left) or TGFβ-treated (right), using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled with Alexa Fluor® 555 phalloidin (red).


Flow Cytometry

Flow Cytometry

Flow cytometric analysis of HT-1080 cells using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb #9523 (blue) compared to a nonspecific negative control antibody (red).

Chromatin IP-seq

Chromatin IP-seq

Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from HaCaT cells treated with Human TGF-β3 #3706 (7 ng/ml) for 1 h and Smad3 (C67H9) Rabbit mAb, using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. DNA Libraries were prepared using SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795. The figure shows binding across CDKN1A, a known target gene of Smad3 (see additional figure containing ChIP-qPCR data). For additional ChIP-seq tracks, please download the product data sheet.

Chromatin IP

Chromatin IP

Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from HaCaT cells treated with Human TGF-β3 #3706 (7 ng/ml) for 1 h and either Smad3 (C67H9) Rabbit mAb or Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669, SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.


バックグラウンド

Members of the Smad family of signal transduction molecules are components of a critical intracellular pathway that transmit TGF-β signals from the cell surface into the nucleus. Three distinct classes of Smads have been defined: the receptor-regulated Smads (R-Smads), which include Smad1, 2, 3, 5, and 8; the common-mediator Smad (co-Smad), Smad4; and the antagonistic or inhibitory Smads (I-Smads), Smad6 and 7 (1-5). Activated type I receptors associate with specific R-Smads and phosphorylate them on a conserved carboxy terminal SSXS motif. The phosphorylated R-Smad dissociates from the receptor and forms a heteromeric complex with the co-Smad (Smad4), allowing translocation of the complex to the nucleus. Once in the nucleus, Smads can target a variety of DNA binding proteins to regulate transcriptional responses (6-8).

Following stimulation by TGF-β, Smad2 and Smad3 become phosphorylated at their carboxyl termini (Ser465 and 467 on Smad2; Ser423 and 425 on Smad3) by TGF-β Receptor I. Phosphorylated Smad 2/3 can complex with Smad4, translocate to the nucleus and regulate gene expression (9-11).

使用例
 
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Illumina is a registered trademark of Illumina, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.

本製品は試験研究用です。

Smad3 (C67H9) Rabbit mAb

Metabolic Reprogramming in Disease

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