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#3434 Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb

 
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2019年11月21日15時20分 現在
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#3434S100 μL72,000
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#3434T20 μL39,000
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感度分子量 (kDa)抗体の由来貯法
内在性120Rabbit IgG-20℃
種交差性 (社内試験済)
交差する可能性がある種 i

社内試験はしていませんが、配列が100%相同であるため反応すると推定される種

ヒト、サル マウス、ラット、サル、ニワトリ、アフリカツメガエル、ゼブラフィッシュ、ブタ
3434 の推奨プロトコール i

最適な結果を得るために:Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。
推奨プロトコールはCST社内試験の徹底的なバリデーションに基づいて作成されておりますので、正確かつ再現性の高い結果が得られます。

注:各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。

 

ウェスタンブロッティング (1:1000)免疫沈降 (1:50)免疫蛍光細胞染色 (IF-IC) (1:6400)

CST推奨プロトコールに欠かせない関連製品

特異性・感度
内在性レベルのPro564 が水酸化されたHIF-1αタンパク質を検出します。他の過剰発現したプロリン水酸化タンパク質と交差反応する可能性があります。
使用抗原
ヒトのHIF-1αタンパク質のPro564 周辺領域 (合成水酸化ペプチド)

ホモロジー (相同性) 検索をご希望の場合 >>>

ホモロジー検索をご要望の際は、ご希望のサンプル種のアミノ酸配列とともにお問合せください。

社内データ

※下記の社内データは、すべて3434 の推奨プロトコールで実験した結果です。

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from HeLa cells, treated with either 10 μM of MG132 (to accumulate hydroxylated HIF-1α) or 10 µM MG132 and 1 mM DMOG (to accumulate nonhyroxylated HIF-1α), using Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb (upper) or total HIF-1α Antibody #3716 (lower).

IF-IC

IF-IC

Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells, treated with either 10 μM MG132 (left) or 10 μM MG132 and 1 mM DMOG (right), using Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled using DY-554 phalloidin (red).

バックグラウンド

Hypoxia-inducible factor 1 (HIF1) is a heterodimeric transcription factor that plays a critical role in the cellular response to hypoxia (1). The HIF1 complex consists of two subunits, HIF-1α and HIF-1β, which are basic helix-loop-helix proteins of the PAS (Per, ARNT, Sim) family (2). HIF1 regulates the transcription of a broad range of genes that facilitate responses to the hypoxic environment, including genes regulating angiogenesis, erythropoiesis, cell cycle, metabolism, and apoptosis. The widely expressed HIF-1α is typically degraded rapidly in normoxic cells by the ubiquitin/proteasomal pathway. Under normoxic conditions, HIF-1α is proline hydroxylated leading to a conformational change that promotes binding to the von Hippel Lindau protein (VHL) E3 ligase complex; ubiquitination and proteasomal degradation follows (3,4). Both hypoxic conditions and chemical hydroxylase inhibitors (such as desferrioxamine and cobalt) inhibit HIF-1α degradation and lead to its stabilization. In addition, HIF-1α can be induced in an oxygen-independent manner by various cytokines through the PI3K-AKT-mTOR pathway (5-7).

HIF-1β is also known as AhR nuclear translocator (ARNT) due to its ability to partner with the aryl hydrocarbon receptor (AhR) to form a heterodimeric transcription factor complex (8). Together with AhR, HIF-1β plays an important role in xenobiotics metabolism (8). In addition, a chromosomal translocation leading to a TEL-ARNT fusion protein is associated with acute myeloblastic leukemia (9). Studies also found that ARNT/HIF-1β expression levels decrease significantly in pancreatic islets from patients with type 2 diabetes, suggesting that HIF-1β plays an important role in pancreatic β-cell function (10).

Two critical prolines in HIF-1α (Pro564 and Pro402) can be hydroxylated by proline hydroxylase under normoxia conditions. Hydroxylation of HIF-1α leads to its binding to VHL and ubiquitin mediated degradation (3,11,12).

使用例
 
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MultiMab is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.

本製品は試験研究用です。

Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb

Metabolic Reprogramming in Disease

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