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#14697 Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb

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2019年11月13日11時50分 現在
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#14697S100 μL56,000
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尚、構成品の単品販売は致しておりません。

CAS9 製品一覧 | CRISPR/Cas9 関連製品一覧

感度分子量 (kDa)抗体の由来貯法
トランスフェクト160Mouse IgG1-20℃
種交差性 (社内試験済)
交差する可能性がある種 i

社内試験はしていませんが、配列が100%相同であるため反応すると推定される種

すべての種 -
14697 の推奨プロトコール i

最適な結果を得るために:Cell Signaling Technology (CST) 社は、各製品の推奨プロトコールを使用することを強くお薦めいたします。
推奨プロトコールはCST社内試験の徹底的なバリデーションに基づいて作成されておりますので、正確かつ再現性の高い結果が得られます。

注:各製品に最適化されたプロトコールをリンクしています。

 

ウェスタンブロッティング (1:1000)免疫組織染色 (パラフィン) (1:100)免疫蛍光細胞染色 (IF-IC) (1:800)フローサイトメトリー (1:50)

下記ステップについては、データシートの右側もあわせてご参照ください。

IHC-P: 抗体希釈液 / 抗原賦活化

CST推奨プロトコールに欠かせない関連製品

特異性・感度
トランスフェクトレベルのCas9 (S. pyogenes) タンパク質を検出します。
使用抗原
Cas9 (S. pyogenes) タンパク質のN末端特異的な組換えタンパク質

ホモロジー (相同性) 検索をご希望の場合 >>>

ホモロジー検索をご要望の際は、ご希望のサンプル種のアミノ酸配列とともにお問合せください。

社内データ

※下記の社内データは、すべて14697 の推奨プロトコールで実験した結果です。

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-) or transfected with a construct expressing Cas9 (+), using Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (upper) and β-Actin (13E5) Rabbit mAb #4970 (lower).

Western Blotting

Western Blotting

Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-), or transfected with a construct expressing Cas9 protein isolated from S.pyogenes (spCas9) (+), or recombinant nuclease-deficient Cas9 (dCas9) protien, or recombinant Cas9 nickase (niCas9) protein, using Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb.

IHC-P (paraffin)

IHC-P (paraffin)

Immunohistochemical analysis of Cas9 expression in Nprl2-deficient 293 (left, positive) and untreated 293 (right, negative) cell pellets using Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb. Nprl2 expression was knocked out in the Nprl2-deficient cells by transient transfection of Cas9 and Nprl2-specific guide sequences. 293/Nprl2 -/- cells were kindly provided by Rachel Wolfson, Lynne Chantranupong, and David Sabatini of MIT, Cambridge, MA.


IF-IC

IF-IC

Confocal immunofluorescent analysis of Cas9 expression in Nprl2-deficient (left) and untreated 293 cells (right) using Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (green). Actin filaments were labeled with DyLight™ 554 Phalloidin #13054 (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye). 293/Nprl2 -/- cells were kindly provided by Rachel Wolfson, Lynne Chantranupong, and David Sabatini of MIT, Cambridge, MA.

Flow Cytometry

Flow Cytometry

Flow cytometric analysis of HEK-293 cells untreated (blue) or transfected with NPRL2 knock out (-/-) plasmid (green) Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb. Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 was used as a secondary antibody.

バックグラウンド

The CRISPR associated protein 9 (Cas9) is an RNA-guided DNA nuclease and part of the Streptococcus pyogenes CRISPR antiviral immunity system that provides adaptive immunity against extra chromosomal genetic material (1). The CRISPR antiviral mechanism of action involves three steps: (i), acquisition of foreign DNA by host bacterium; (ii), synthesis and maturation of CRISPR RNA (crRNA) followed by the formation of RNA-Cas nuclease protein complexes; and (iii), target interference through recognition of foreign DNA by the complex and its cleavage by Cas nuclease activity (2). The type II CRISPR/Cas antiviral immunity system provides a powerful tool for precise genome editing and has potential for specific gene regulation and therapeutic applications (3). The Cas9 protein and a guide RNA consisting of a fusion between a crRNA and a trans-activating crRNA (tracrRNA) must be introduced or expressed in a cell. A 20-nucleotide sequence at the 5' end of the guide RNA directs Cas9 to a specific DNA target site. As a result, Cas9 can be "programmed" to cut various DNA sites both in vitro and in cells and organisms. CRISPR/Cas9 genome editing tools have been used in many organisms, including mouse and human cells (4,5). Research studies demonstrate that CRISPR can be used to generate mutant alleles or reporter genes in rodents and primate embryonic stem cells (6-8).

使用例
 
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9999   Nonfat Dry Milk

DRAQ5 is a registered trademark of Biostatus Limited.
Tween is a registered trademark of ICI Americas, Inc.
SignalStain is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
DyLight is a trademark of Thermo Fisher Scientific, Inc. and its subsidiaries.

本製品は試験研究用です。

Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb

Immune Cell Signaling Pathways

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